dc.contributor.author
Roy, Amrit
dc.date.accessioned
2018-06-07T23:37:15Z
dc.date.available
2016-11-30T10:14:06.102Z
dc.identifier.uri
https://refubium.fu-berlin.de/handle/fub188/10730
dc.identifier.uri
http://dx.doi.org/10.17169/refubium-14928
dc.description.abstract
Hintergrund: Die dendritische Zelltherapie bietet bei der Behandlung von
Krebserkrankungen einen neuartigen therapeutischen Ansatz. Bei der Leukämie
besteht die Möglichkeit leukämische Blasten durch Zytokin-Stimulation in
leukämische dendritische Zellen (DC) zu differenzieren. Dadurch können neben
unbekannten Tumorantigenen spezifische Tumor-assoziierte Antigene (TAA) dem
Immunsystem präsentiert werden (Blair et al., 2001; B. A. Choudhury et al.,
1999; Cignetti et al., 1999). Ein solches spezifisches TAA ist das TEL/AML1
Fusionsprotein, welches als Produkt aus der Translokation t(12;21)(p13;q22)
entsteht. Es ist das häufigste Fusionsgen in der kindlichen akuten
lymphatischen Leukämie (B-Vorläufer-Zell-ALL) (Shurtleff et al., 1995). Yotnda
et al. haben 1998 zum ersten Mal gezeigt, dass eine TEL/AML1 Fusionssequenz
eine zytotoxische T-Zellantwort auslösen kann (Yotnda et al., 1998). Schmidt
et al. erarbeiteten 2009 erfolgreich Zytokincocktails, die aus
TEL/AML1-positive leukämische Blasten dendritische Zellen generieren (Schmidt
et al., 2009). Ziel dieser Arbeit ist es festzustellen, ob die zusätzliche
Gabe des TEL/AML1 Fusionspeptids die zytokininduzierte Differenzierung
leukämischer TEL/AML1 positiver Blasten in DCs optimiert. In diesem Fall
könnte eine spezifische DC-Therapie gegen die TEL/AML1 positive ALL entstehen.
Methoden: Wir verwendeten eine Peptidsequenz des TEL/AML1 Onkoproteins aus der
Fusionsregion. Dieses ist ein nicht natürliches Peptid und wird von gesunden
Zellen nicht synthetisiert. Die Wirkung des TEL/AML1 Peptids wurde
durchflusszytometrisch in drei Konzentrationsstufen auf die Differenzierung
der TEL/AML1 positiven ALL Zelllinie (REH) zu DCs untersucht. Zum Vergleich
erfolgte die durchflusszytometrische Untersuchung anhand TEL/AML1 negativer
CML Zelllinien (K562) (Chronisch myeloische Leukämie) und humaner Monozyten.
Ergebnis: Es ist gelungen, eine mäßige Differenzierung humaner Monozyten in
reife Antigen-präsentierenden Zellen (APC) zu erzielen. Allerdings führte das
TEL/AML1 Peptid unerwartet zu einer Herabregulation der Differenzierung von
TEL/AML1 positiven ALL Zelllinien zu DCs. Im Vergleich zeigte das TEL/AML1
Peptid auf die TEL/AML1 negative CML Zelllinie keine Wirkung.
Schlussfolgerung: In dieser Arbeit konnte erstmals gezeigt werden, dass die
Fusionssequenz von TEL/AML1 die Differenzierung zu leukämischen DCs trotz
Zytokin-Stimulation hemmt. Diese Wirkung scheint spezifisch bei der TEL/AML1
positiven Leukämiezelllinie zu sein, da es zu keiner Wirkung auf die TEL/AML1
negative CML Zelllinie kam. Somit ist dieses Peptid offensichtlich nicht
geeignet für eine DC-Therapie. Außerdem scheint die Fusionssequenz per se den
leukämischen Blastenzustand zu bewahren. Ein Grund hierfür könnte eine
intrazelluläre Kopplung oder Interaktion mit einem weiteren Protein sein.
Dieses könnte zur Hemmung der Differenzierung führen. In weiteren Studien
sollte die Wirkung der TEL/AML1 Fusionssequenz auf TEL/AML1 positive
leukämische Blasten untersucht werden um den Pathomechanismus bei der TEL/AML1
positiven ALL besser zu verstehen.
de
dc.description.abstract
Background: Dendritic cell (DC) therapy offers a novel therapeutic approach in
the treatment of different forms of cancer. In the case of leukemia the aim of
the DC therapy would be to differentiate leukemic blasts through cytokine
stimulation into dendritic cells. Thus known and unknown tumor-associated
antigens are presented to the immune system (Blair et al., 2001; B. A.
Choudhury et al., 1999; Cignetti et al., 1999). Further an ideal target as a
tumor-associated antigen could be the oncoprotein TEL/AML1, which is a result
of the chromosomal translocation (12;21)(p13;q22) and represents the most
common fusion gene in childhood B-cell precursor acute lymphoblastic leukemia
(BCP-ALL) (Shurtleff et al., 1995). Yotnda et al. has shown that this epitope
created through the fusion gene of TEL and AML1 leads to a cytotoxic T-cell
response (Yotnda et al., 1998). In 2009 Schmidt et al. successfully developed
cytokin-cocktails, which differentiated TEL/AML1-positive leukemic blasts into
dendritic cells (Schmidt et al., 2009). Due to these findings, it is assumed
that the addition of the TEL/AML1 peptide would enhance the cytokine-
stimulated differentiation of TEL/AML1 positive leukemic blasts into leukemic
DCs. This could lead to a specific DC-therapy against the TEL/AML1 positive
ALL. Methods: We used a peptide sequence of the TEL/AML1 oncoprotein
representing the fusion region. As this peptide is not synthesized naturally
by healthy cells, it would have the highest probability of triggering an
immunogenic reaction. Via flow cytometry several concentration levels of the
TEL/AML1 peptide were examined on the differentiation of the cell lines into
APCs in vitro. As a source for leukemic blasts we used the human TEL/AML1
positive acute lymphoblastic leukemic (ALL) cell line of REH cells comparing
them with the human TEL/AML1 negative chronic myeloid leukemic (CML) cell line
of K562 and human monocytes. Results: It was possible to moderately induce
monocytes into mature antigen presenting cells. Unexpectedly though the
TEL/AML1 peptide decreased the differentiation of the TEL/AML1 positive ALL
cell line (REH) into DCs. In comparison the peptide didn’t have any effect on
the TEL/AML1 negative CML cell line (K562). Conclusion: The TEL/AML1 fusion
sequence seems to inhibit the differentiation into leukemic DCs in spite of
cytokine stimulation. Due to this, the peptide is probably not suitable for a
dendritic cell therapy. This effect seems to be specific for the TEL/AML1
positive leukemic cell line, as no effect was observed on the TEL/AML1
negative CML cell line. The results show that the TEL/AML1 peptide could be
responsible in conserving a leukemic state on TEL/AML1 positive leukemic
blasts. A possible cause could be an intracellular binding or interaction with
another protein. This could lead to an inhibition of differentiation. Due to
these discoveries further research is needed to evaluate the function of the
TEL/AML1 fusion peptide in the pathomechanism of the TEL/AML1 positive ALL.
en
dc.rights.uri
http://www.fu-berlin.de/sites/refubium/rechtliches/Nutzungsbedingungen
dc.subject
dendritic cell vaccine
dc.subject
acute lymphoblastic leukemia
dc.subject
cancer therapy
dc.subject.ddc
600 Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften::610 Medizin und Gesundheit
dc.title
Immunogene Wirkung des TEL/AML1 Onkopeptids auf leukämische Zelllinien
dc.contributor.firstReferee
N.N.
dc.contributor.furtherReferee
N.N.
dc.date.accepted
2016-12-09
dc.identifier.urn
urn:nbn:de:kobv:188-fudissthesis000000103226-8
dc.title.translated
Immunogenic effect of the TEL/AML1 Onkopeptide on leukemic cell lines
en
refubium.affiliation
Charité - Universitätsmedizin Berlin
de
refubium.mycore.fudocsId
FUDISS_thesis_000000103226
refubium.mycore.derivateId
FUDISS_derivate_000000020180
dcterms.accessRights.dnb
free
dcterms.accessRights.openaire
open access