dc.contributor.author
Steding, Ina
dc.date.accessioned
2018-06-07T23:32:54Z
dc.date.available
2016-06-08T10:47:34.338Z
dc.identifier.uri
https://refubium.fu-berlin.de/handle/fub188/10617
dc.identifier.uri
http://dx.doi.org/10.17169/refubium-14815
dc.description.abstract
Ziel Geburten vor der 37. Schwangerschaftswoche stellen in Deutschland
weiterhin eine geburtsmedizinische und neonatologische Herausforderung dar.
Von diesen sind bis zu 40% der Frühgeburten infektiös bedingt. Zur
Identifikation eines Amnioninfektionssyndroms (AIS) und der beteiligten
Mikroorganismen werden routinemäßig eine kulturbasierte und histologische
Diagnostik durchgeführt. Ziel dieser Studie ist es, ein kontaminationsarmes
Studienprotokoll zu entwickeln und anschließend molekularbiologische
Nachweismethoden (FISH, PCR) zur Detektion der beteiligten Mikroorganismen
einzuführen und die Ergebnisse mit der konventionellen Diagnostik zu
vergleichen. Methodik Die Studie setze sich aus 25 Patientinnen in der AIS-
Gruppe und 25 Patientinnen der Kontrollgruppe zusammen. Zur Minimierung der
mikrobiellen Kontamination während der Entnahme der Plazenta- und Eihaut-
Proben nach Sectio caesarea wurde ein Entnahmeprotokoll zur Standardisierung
der Vorgehensweise entwickelt. Anschließend wurden mittels 16S rRNA Sonden die
Fluoreszenz-in-situ-Hybridisierung sowie die PCR des 16S rRNA-Gens
durchgeführt. Zur Evaluierung dieser Methoden erfolgte der Vergleich der
Ergebnisse mit den Resultaten der kulturellen und histo-pathologischen
Untersuchungen. Ergebnis Die FISH und PCR konnten in vielen Fällen eine
Besiedlung der Eihäute nachweisen und die besiedelnde Spezies identifizieren.
Häufig stellte dies eine Ergänzung zur kulturellen Untersuchung dar, die nicht
zuverlässig einen Besiedlungsnachweis bei histo-pathologisch gesichertem AIS
erbringen konnte. Vereinzelt ergab sich eine durch FISH und PCR
identifizierte, mikrobielle Besiedlung, die histologisch und kulturell nicht
bestätigt werden konnte. Schlussfolgerung Die Ergebnisse der Studie legen
nahe, dass die FISH und PCR eine wertvolle Ergänzung in der Diagnostik eines
AIS darstellen und Hinweise auf deren Entstehungsmechanismus liefern.
Weiterhin war es möglich, ein kontaminationsarmes Studienprotokoll zu
entwickeln und eEPK als Werkzeug zur Prozessbeschreibung in der medizinischen
Forschung zu etablieren. Die Untersuchung der Kontrollpatientinnen erbrachte
neue Hinweise, die gegen das häufige Vorkommen klinisch unauffälliger
Infektionen bei normal verlaufenden Schwangerschaften sprechen. Aufgrund der
geringen Größe einer Probe ist es möglich, dass mitunter besiedelte Areale
nicht erfasst wurden. Eine Weiterführung der Untersuchungen an zusätzlichen
betroffenen Patientinnen ist notwendig, um die Ergebnisse zu verifizieren und
ein besseres Verständnis der Pathogenese des AIS zu entwickeln.
de
dc.description.abstract
Aim of the study Preterm birth is still an obstetrical and neonatological
challenge in Germany. 40% of these deliveries are induced by infectious
agents. The identification of chorioamnionitis and the causing microorganisms
is currently obtained by culture-based methods and histological diagnosis. The
objective of this study is to originate a contamination-free study protocol as
a basis to analyse samples taken from the amniotic membrane and the placenta.
Results derived from sample analysis through moleculobiological methods (FISH,
PCR) are matched against conventional diagnosis. Methods The study population
consists of 25 inpatients with chorioamnionitis delivering via secondary
Caesarean section and 25 inpatients that delivered by a planned Caesarean
section. A standarised extraction protocol has been developed to minimise
microbial contamination during sample acquisition after the Caesarean section.
The following working steps included Fluorescence-in-situ-hybridisation with
16S rRNA-probes and RT-PCR of the 16SrRNA-gene. The results of the
moleculobiological based methods have been compared to the results of culture-
based and histological methods. Results FISH and PCR identified a microbial
colonisation of the amniotic membrane and the precise species. This is a
useful supplement to culture-based methods since those were not able to detect
a microbial colonisation in a histological ensured chorioamnionitis.
Occasionally, FISH and PCR detected a microbial infection that could not be
verified by culture-based and histological methods. Conclusion The results of
this study suggest that moleculobiological methods are valuable additions in
the diagnostic process of chorioamnionitis. They provide new indications of
the formation and origin of chorioamnionitis that leads to a better
understanding of this medical condition. Furthermore, we were able to provide
a standardized contamination-free study protocol and implemented eEPK as a
medical process description notation. Additionally, we demonstrated the
absence of microbial invasion in normal gestations. The limitations of this
study are the small number of inpatients and the limited number of samples
derived and analysed from each patient. Further studies are required to verify
the obtained results.
en
dc.rights.uri
http://www.fu-berlin.de/sites/refubium/rechtliches/Nutzungsbedingungen
dc.subject
Chorioamnionitis
dc.subject
microorganisms
dc.subject.ddc
600 Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften::610 Medizin und Gesundheit
dc.title
Das Amnioninfektionssyndrom: Molekularbiologische Identifikation von
Mikroorganismen an Eihäuten
dc.contributor.contact
ina.steding@charite.de
dc.contributor.firstReferee
N.N.
dc.contributor.furtherReferee
N.N.
dc.date.accepted
2016-06-05
dc.identifier.urn
urn:nbn:de:kobv:188-fudissthesis000000101729-7
dc.title.translated
Chorioamnionitis: microbiological identification of microorganisms on amniotic
membranes
en
refubium.affiliation
Charité - Universitätsmedizin Berlin
de
refubium.mycore.fudocsId
FUDISS_thesis_000000101729
refubium.mycore.derivateId
FUDISS_derivate_000000018957
dcterms.accessRights.dnb
free
dcterms.accessRights.openaire
open access