Diese Publikationspromotion setzt sich aus drei Veröffentlichungen zur molekularen Diagnostik der Infektiösen Endokarditis (IE) bzw. Sepsis mittels Fluoreszenz in situ Hybridisierung (FISH) zusammen. Die FISH ist eine molekularbiologische Methode, bei der Mikroorganismen kulturunabhängig durch fluoreszenzmarkierte Oligonukleotidsonden mikroskopisch dargestellt werden. Sowohl IE als auch Sepsis sind mit einer hohen Mortalität verbunden und bedürfen einer zielgerichteten Therapie. Die dafür notwendige genaue Identifizierung des ursächlichen Erregers gelingt aber durch die etablierten, kulturbasierten Routinemethoden häufig nicht. Das liegt zum einen an schwer kultivierbaren Erregern, zum anderen an der häufig bereits vor der Diagnosestellung begonnenen Antibiotikatherapie. Initial wurde ein Set aus FISH Sonden entwickelt und evaluiert, das die häufigsten Gram-positiven Sepsiserreger innerhalb von 3 Stunden zuverlässig identifizieren kann. In einem zweiten Schritt konnte am klinisch unklaren Fall einer durch B. quintana verursachten Endokarditis bewiesen werden, dass die Diagnose der IE durch schwer kultivierbare Erreger mittels FISH an Gewebsschnitten möglich ist. Das FISH-Sondenpanel für die Sepsisdiagnosik stand somit für den Nachweis von Erregern an Herzklappen zur Verfügung. Darüber hinaus wurden weitere Sonden entwickelt bzw. modifiziert, die neben den typischen auch seltenere IE- verursachende Erreger wie z.B. Granulicatella adiacens oder Tropheryma whipplei erfassen. In einer Pilotstudie konnte bei 26 von 54 Patienten eine IE mittels FISH diagnostiziert werden. Darunter waren 5 kultur-negative und 10 fragliche Fälle, bei denen mittels FISH zweifelsfrei die ursächlichen Bakterien im Gewebe identifiziert werden konnten. Aufgrund der erfreulichen Ergebnisse dieser Pilotstudie wird FISH in unserem Haus bereits ergänzend zur Routinediagnostik der IE in ausgewählten Fällen genutzt und trägt zu einem verbesserten Patienten-Management bei.
This publication consists of three promotional publications for the molecular diagnosis of infectious endocarditis (IE) or sepsis by fluorescence in situ hybridization (FISH). Infective endocarditis is a rare but life-threatening disease associated with high mortality. Early diagnosis of the causative microorganism is critical to patient outcome. However, conventional diagnostic methods are often unsatisfactory in achieving this goal. As a proof of concept, we applied fluorescence in situ hybridization (FISH) for detection and identification of bacteria in histological sections of heart valves. Biopsy specimens from 54 suspected endocarditis patients were obtained during valve surgery and analysed via FISH. Specimens were screened with a probe panel that identifies the most common bacteria implicated in endocarditis. Results were compared with those of culture-based diagnostics and clinical data. Discrepant results were subjected to comparative sequence analysis of PCR-amplified 16S rRNA genes. FISH detected bacteria in 26 of the 54 heart valves. FISH allowed successful diagnosis of infective endocarditis in five of 13 blood culture-negative cases and in 11 of 37 valve culture-negative cases, showing the bacteria within their histological context. This technique allows the simultaneous detection and identification of microorganisms at the species or genus level directly from heart valves and might be a valuable tool for diagnosis of endocarditis.Due to the encouraging results of this pilot study FISH is already used in addition to routine diagnosis of IE in selected cases and contributes to improved patient management.
