id,collection,dc.contributor.author,dc.contributor.firstReferee,dc.contributor.furtherReferee,dc.contributor.gender,dc.date.accepted,dc.date.accessioned,dc.date.available,dc.date.issued,dc.description.abstract[de],dc.description.abstract[en],dc.format.extent,dc.identifier.uri,dc.identifier.urn,dc.language,dc.rights.uri,dc.subject.ddc,dc.subject[en],dc.title,dc.title.translated[de],dc.type,dcterms.accessRights.dnb,dcterms.accessRights.openaire,dcterms.format,refubium.affiliation,refubium.isSupplementedBy.url "986e33ea-a940-408c-bada-8f31d316b997","fub188/13","Diedrichs, Falk","N.N.","N.N.","male","2021-09-17","2021-09-15T13:01:57Z","2021-09-15T13:01:57Z","2021","Die steigende Fallzahl von Patienten mit kardiovaskulären Erkrankungen und die eingeschränkte Verfügbarkeit von Spenderherzen erfordert die Entwicklung neuer und verbesserter Therapieoptionen. Vor diesem Hintergrund sind humane Herzohrabgeleitete Zellen ([engl.] human atrial appendage-derived cells; hAACs) vielversprechende Kandidaten für ein allogenes Behandlungsverfahren. In dieser Dissertation wurden hAACs analysiert bezüglich ihrer (I) zellulären Charakteristika nach langfristiger Kryokonservierung, (II) Interaktionen mit Zellen des adaptiven Immunsystems in vitro, und (III) zugrundeliegenden Wirkmechanismen eben jener Interaktionen. (I) Die Charakterisierung von hAACs anhand einheitlicher Kriterien der International Society of Cell & Gene Therapy (ISCT) ergab ein Oberflächenmarkerprofil, das ähnlich zu dem von konventionellen mesenchymal stromalen Zellen (MSCs) war. Im Gegensatz zu diesen waren hAACs in vitro allerdings nicht in der Lage, in Osteoblasten, Chondroblasten oder Adipozyten zu differenzieren und exprimierten den Oberflächenmarker CD90 nur zu einem geringen Grad. (II) Das hAAC Zellprodukt besitzt einen niedrig immunogenen Phänotyp nach Stimulation mit IFNγ, der sich durch moderate Expression von HLA-DR, Abwesenheit ko-stimulatorischer Marker, sowie Hochregulation von PD-L1 und PD-L2 Liganden auszeichnet. Bedeutsam ist, dass hAACs keine allogenen Immunreaktionen in Ko-Kulturen mit humanen Leukozyten-Antigen (HLA)-inkompatiblen mononukleären Zellen des peripheren Blutes (PBMCs) induzierten. Weiterhin unterdrückten hAACs besonders wirksam bereits initiierte Immunreaktion, vor allem in inflammatorischen Umgebungen. Dies zeigte sich in einer supprimierten T-Zell Proliferation und reduzierten Freisetzung pro-inflammatorischer Zytokine (IFNγ, TNFα, TNFβ, IL-17A) in Ko-Kulturen mit αCD3/αCD28-aktivierten PBMCs. Transwell Experimente bestätigten, dass hauptsächlich lösliche Faktoren verantwortlich für die beobachteten immunmodulatorischen Eigenschaften von IFNγ vorbehandelten hAACs waren. (III) Durch eine Genom-weite Analyse der Gen Expression von drei Spendern konnte letztlich Indolamin-2,3-Dioxygenase (IDO) als zentrales Schlüsselmolekül der Suppression von T-Zell Proliferation und Induktion derer Apoptose identifiziert werden.Zusammenfassung VI Demzufolge präsentieren sich hAACs als einzigartiger und definierter MSC-artiger Subtyp mit atypischen, aber klinisch interessanten Eigenschaften. Die gezeigten Ergebnisse legen die Sicherheit des hAAC Produktes für eine allogene Anwendung nahe. Zudem deuten sie auch auf die Möglichkeit hin ungünstiges kardiales Remodeling, durch die effektive Modulation des fehlgeleiteten Immunsystems, zu limitieren.","Rising numbers of patients with cardiovascular diseases and limited availability of donor hearts require novel and improved therapy strategies. Here, human atrial appendage-derived cells (hAACs) emerged as promising candidates for an allogeneic cell-based treatment. In this thesis, hAACs were analyzed for (I) their cellular characteristics after long-term cryopreservation, (II) their interaction with cells from the adaptive immune system in vitro, and (III) their underlying mode of action exerted in the crosstalk with immune cells. (I) Characterization of hAACs, according to standardized classification criteria of the International Society of Cell & Gene Therapy (ISCT), revealed a surface marker profile similar to conventional mesenchymal stromal cells (MSCs). However, hAACs were in contrast unable to differentiate into osteoblasts, chondroblasts or adipocytes in vitro and expressed the surface marker CD90 only on a low level. (II) The hAAC product demonstrated a low immunogenic phenotype after IFNγ pre-stimulation by moderate de novo expression of HLA-DR, lacking expression of co-stimulatory molecules, and upregulation of the inhibitory ligands PD-L1 and PD-L2. Most importantly, they did not induce allogeneic immune responses in co-cultures with human leukocyte antigen (HLA)-mismatched peripheral blood mononuclear cells (PBMCs). Furthermore, hAACs efficiently suppressed ongoing immune responses, especially in inflammatory environments, as seen in the reduction of T cell proliferation and decline of pro-inflammatory cytokine release (IFNγ, TNFα, TNFβ, IL-17A) in co-cultures with αCD3/αCD28-activated PBMCs. Transwell experiments confirmed that mostly soluble factors were responsible for the observed immunomodulatory effect of hAACs after IFNγ pre-treatment. (III) Lastly, indolamine-2,3-dioxygenase (IDO) could be identified as the key molecule of action involved in the suppression of T cell proliferation and induction of their apoptosis through a genome-wide gene expression analysis of three donors. Thus, hAACs represent a unique and distinct MSC-like cell subset with atypical but clinically interesting features. Moreover, the presented data not only suggests the safety of the hAAC product for an allogeneic application, but also indicates its compelling potential to limit adverse remodeling after cardiac injury by effectively modulating the misdirected immune system.","VI, 72","https://refubium.fu-berlin.de/handle/fub188/30316||http://dx.doi.org/10.17169/refubium-30056","urn:nbn:de:kobv:188-refubium-30316-8","eng","https://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0/","600 Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften::610 Medizin und Gesundheit::610 Medizin und Gesundheit","cell-based therapies||immunogenicity||immunomodulation||IFNg||IDO||allogeneic","Defining the role of cardiac-derived cells as modulators of major immune responses in inflammatory environments","Die Rolle kardial-abgeleiteter Zellen als potente Modulatoren von Immunreaktionen unter Inflammation","Dissertation","free","open access","Text","Charité - Universitätsmedizin Berlin","https://www.ncbi.nlm.nih.gov/geo/query/acc.cgi?acc=GSE12646"